مقایسه دو روش PCR مستقیم و PCR با استفاده از روش استخراج DNA در تعیین تیپ‌های مختلف کلستریدیوم پرفرینجنس

Authors: not saved
Abstract:

     واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) یک روش مناسب برای شناسایی عوامل بیماری‌زا محسوب می‌شود و جداسازی DNA اولین گام در این مسیر است.  استخراج DNA یک مرحله وقت‌گیر در تحقیقات ژنتیک مولکولی به شمار می‌آید که در بعضی موارد از کل مراحل انجام PCR طولانی‌تر است.  هدف از انجام این تحقیق، استفاده از PCR مستقیم (بدون استخراج DNA) جهت تعیین تیپ‌های مختلف باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس می‌باشد.  در این تحقیق PCR مستقیم و همچنین PCR با DNA استخراج شده بر روی چهار تیپ A، B، C و D باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس انجام شد، که برای این هدف از چهار جفت پرایمر اختصاصی که مکمل بخش‌هایی از ژن‌های کد‌ کننده توکسین‌های آلفا، بتا، اپسیلون و یوتای این باکتری بودند استفاده گردید.  در هر دو روش PCR مستقیم و PCR با DNA استخراج شده، قطعات 196، 324 و 655 جفت بازی سنتز گردید که به ترتیب مربوط به توکسین آلفا، بتا و اپسیلون می‌باشند.  در نهایت براساس طول قطعات سنتز شده در PCR، تیپ‌های مختلف این باکتری تشخیص داده شدند.  نتایج این تحقیق نشان می‌دهد که انجام PCR به طور مستقیم از کلونی بسیار ساده است و کیفیت باند ایجاد شده در PCR مستقیم و PCR با DNA استخراج شده با هم تفاوتی ندارند.  بنابراین با توجه به اینکه استفاده از PCR مستقیم زمان، مراحل و هزینه PCR را کاهش می‌دهد و امکان آزمون تعداد زیادی نمونه را در زمان کوتاهتری فراهم می‌آورد، استفاده از این روش توصیه می‌گردد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

مقایسه دو روش pcr مستقیم و pcr با استفاده از روش استخراج dna در تعیین تیپ های مختلف کلستریدیوم پرفرینجنس

واکنش زنجیره ای پلیمراز (pcr) یک روش مناسب برای شناسایی عوامل بیماری زا محسوب می شود و جداسازی dna اولین گام در این مسیر است.  استخراج dna یک مرحله وقت گیر در تحقیقات ژنتیک مولکولی به شمار می آید که در بعضی موارد از کل مراحل انجام pcr طولانی تر است.  هدف از انجام این تحقیق، استفاده از pcr مستقیم (بدون استخراج dna) جهت تعیین تیپ های مختلف باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس می باشد.  در این تحقیق pcr مس...

full text

مقایسه دو روش PCR مستقیم و PCR با استفاده ازDNA استخراج شده توسط کیت در تعیین ژنهای tst و mecA در باکتری استافیلوکوک اورئوس

چکیده: مقدمه: انجام واکنش PCR یکی از دقیق ترین و حساس ترین تست ها برای سنجش های مولکولی می باشد. استخراج DNA همیشه از وقت گیرترین و هزینه برترین مراحل قبل از PCR می باشد که با حذف آن در برخی شرایط می توان در زمان و هزینه صرفه جویی کرد. هدف از این مطالعه مقایسه دو روش  PCR مستقیم و PCR با استخراج DNA الگو  در شناسایی ژن های tst و mecA و femA ی باشد. روش کار: در این بررسی ایزوله های بالینی استافی...

full text

مقایسه دو روش PCR مستقیم و PCR با DNA استخراج‌شده توس‌کیت برای ردیابی ژن‌هایOPrL ،ExoA ، algDدر ایزوله‌های بالینی سودوموناس آئروژینوزا

زمینه و هدف: سودوموناس آئروژینوزا، یکی از رایج‌ترین عوامل عفونت‌های بیمارستانی محسوب می‌شود. بیشتر آزمایشگاه‌ها به‌طور معمول برای شناسایی سودوموناس آئروژینوزا، از روش کشت و تست‌های بیوشیمیایی مختلف استفاده می‌کنند که روشی وقت‌گیر بوده و در برخی موارد دارای نتایج مثبت و منفی کاذب می‌باشد. هدف از انجام این پژوهش مقایسه دو روش مولکولی PCR با استفاده از DNA استخراج‌شده با کیت و PCR با استفاده از کل...

full text

تعیین ژنوتیپ مقایسه ای جدایه های کلستریدیوم پرفرینجنس در گوسفندان ومرغان گوشتی با روش multiplex pcr

کلستریدیوم پرفرینجنس که یکی از باکتری های بیماری زا با گسترش بسیار در محیط می باشد، باسیلی بی¬هوازی، گرم مثبت و اسپوردار است. کلستریدیوم پرفرینجنس را بر اساس چهار توکسین عمده و کشنده حاصل از آن (آلفا، بتا، اپسیلون و یوتا) به پنج تیپ از a تا e تقسیم می کنند. بجز سموم اصلی فوق الذکر، حداقل سیزده توکسین کم اهمیت تر دیگر که در پاتوژنز بیماری نقش دارند، نیز شناخته شده اند که شامل توکسین های دلتا، تت...

تعیین گونه‌ی فاسیولا با استفاده از روش PCR-RFLP

Background and Objective: Fascioliasis is an important zoonotic disease that causes several health problems and economical losses in different parts of Iran including Zanjan. Fasciola hepatica and F. gigantica are recognized as causative agents of the disease. The differential diagnosis between these two species is very important for planning and control of infection. This study was designed to...

full text

مقایسه حساسیت دو روش RT-PCR و RRT-PCR برای تشخیص ویروس بیماری نیوکاسل در طیور

زمینه مطالعه: بیماری نیوکاسل یکی از مخرب ترین بیماریهای ویروسی طیور در سرتاسر جهان است. هدف: با توجه به اینکه روش‌های سنتی قابلیت محدودی در کنترل این بیماری دارند، انجام این مطالعه به منظور استفاده از تکنولوژی‌های نوین برای تشخیص به موقع بیماری جهت کاهش خسارت پیش روی صنعت طیور می‌باشد. روش کار: استخراج RNA با استفاده از کیت RNease mini و بر اساس دستورالعمل شرکت سازنده انجام شد. RNA استخراج شده ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 8  issue 4

pages  5- 12

publication date 2013-02-01

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023